摘　要：糞大腸菌群是水體糞便污染的指示菌。詳細(xì)介紹了多管發(fā)酵法、濾膜法、紙片法、酶底物法及分子生物學(xué)

方法檢測(cè)糞大腸菌群的優(yōu)缺點(diǎn)及主要應(yīng)用實(shí)例。

關(guān)鍵詞：糞大腸菌群；多管發(fā)酵法；濾膜法；紙片法；酶底物法
糞大腸菌群檢測(cè)方法研究進(jìn)展

 

糞大腸菌群是一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌。該菌主要來(lái)源于人畜糞便，是當(dāng)前國(guó)內(nèi)、外環(huán)境監(jiān)測(cè)部門(mén)評(píng)價(jià)水體污染程度的公認(rèn)指標(biāo)和主要監(jiān)測(cè)項(xiàng)目之一，具有廣泛的衛(wèi)生學(xué)意義。**、快速、可靠的糞大腸菌群檢測(cè)方法對(duì)于準(zhǔn)確及時(shí)地監(jiān)測(cè)水域糞大腸菌群的污染狀況，有效預(yù)報(bào)和控制流行**的發(fā)生與傳播有重要意義。

 

１　糞大腸菌群的檢測(cè)方法

１．１　多管發(fā)酵法

１．１．１　原理

利用大腸菌群繁殖時(shí)使乳糖發(fā)酵，并能使乳糖蛋白胨培養(yǎng)液變黃，同時(shí)產(chǎn)生氣泡。

１．１．２　檢測(cè)方法

１．１．２．１　

水樣接種量將水樣充分混勻后，根據(jù)水樣污染的程度確定水樣接種量。每個(gè)樣品至少用３個(gè)不同的水樣量接種。同一接種水樣量要有５管。相對(duì)未受污染的水樣接種量為１０、１、０．１ｍＬ；受污染水樣接種量根據(jù)污染程度接種１、０．１、０．０１ｍＬ或０．１、０．０１、０．００１ｍＬ等。如接種體積為１０ｍＬ，則試管內(nèi)應(yīng)裝有３倍濃度乳糖蛋白胨培養(yǎng)液５ｍＬ；如接種量為１ｍＬ或少于１ｍＬ，則可接種于普通濃度的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液１０ｍＬ中。

１．１．２．２　

初發(fā)酵實(shí)驗(yàn)將水樣分別接種到盛有乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的發(fā)酵管中，在３７±０．５℃下培養(yǎng)２４±２ｈ。產(chǎn)酸和產(chǎn)氣的發(fā)酵管表明試驗(yàn)陽(yáng)性。如在倒管內(nèi)產(chǎn)氣不明顯，可輕拍試管，有小氣泡升起的為陽(yáng)性。

１．１．２．３　

復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn)輕微振蕩初發(fā)酵試驗(yàn)陽(yáng)性結(jié)果的發(fā)酵管，用３ｍｍ接種環(huán)或**棒將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到ＥＣ培養(yǎng)液中。在４４．５±０．５℃水浴下培養(yǎng)２４±２ｈ。培養(yǎng)后立即觀察，若發(fā)酵管產(chǎn)氣，則表明確信試驗(yàn)陽(yáng)性。

１．１．２．４　計(jì)算和報(bào)告結(jié)果

根據(jù)不同接種量的發(fā)酵管所表現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果的數(shù)目，從ＭＰＮ表中查得相應(yīng)的ＭＰＮ 指數(shù)，計(jì)算每升水中糞大腸菌群數(shù)的*近似值（Ｍｏｓｔ　ｐｒｏｂａｂｌｅｎｕｍｂｅｒ，ＭＰＮ）。

１．２　濾膜法［１］（Ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｔｉｌｔｅｒ，ＭＦ）

１．２．１　原理

將水樣注入已**的放有濾膜（孔徑為０．４５μｍ）的濾器中，經(jīng)過(guò)抽濾，細(xì)菌即被截留在膜上，然后將濾膜貼于Ｍ－ＦＣ培養(yǎng)基上，４４．５℃溫度下進(jìn)行培養(yǎng)。

１．２．２　檢測(cè)方法

１．２．２．１　水樣抽濾

于濾器內(nèi)先加入約１０ｍＬ已**的去離子水，然后再用已**吸量管吸取一定量的充分混勻的待檢水樣，加入濾器中。在負(fù)壓５０ｋＰａ下進(jìn)行抽濾，快濾完前加入**水少許以沖洗濾器內(nèi)壁，使水樣內(nèi)的細(xì)菌全部集中于濾膜上。

１．２．２．２　細(xì)菌培養(yǎng)

用**鑷子夾取濾膜邊緣部分，移放在Ｍ－ＦＣ培養(yǎng)基上，濾膜截留細(xì)菌面向上，濾膜與培養(yǎng)基完全緊貼不能有氣泡，然后將平板倒置，置于４４．５±０．５℃的恒溫培養(yǎng)箱或恒溫水浴中，培養(yǎng)２４±２ｈ。

１．２．２．３　計(jì)數(shù)和報(bào)告結(jié)果

糞大腸菌群菌落在Ｍ－ＦＣ培養(yǎng)基上呈藍(lán)色或藍(lán)綠色，其它非糞大腸菌群菌落呈灰色、淡黃色或無(wú)色。正常情況下，由于溫度和玫瑰酸鹽試劑的選擇性作用，在Ｍ－ＦＣ培養(yǎng)基上很少見(jiàn)到非糞大腸菌菌落。必要時(shí)可將可疑菌落接種于ＥＣ培養(yǎng)液，４４．５±０．５℃培養(yǎng)２４±２ｈ，如產(chǎn)氣則證實(shí)為糞大腸菌群。計(jì)數(shù)呈藍(lán)或藍(lán)綠色的菌落，計(jì)算出每１Ｌ水樣中的糞大腸菌群數(shù)。

１．３　紙片法（Ｐａｐｅｒ　ｓｔｒｉｐ　ｍｅｔｈｏｄ）

１．３．１　原理

紙片法是以紙片、紙膜、膠片等作為培養(yǎng)基載體，將特定的培養(yǎng)基和顯色物質(zhì)附著在上面，通過(guò)糞大腸菌群在上面的生長(zhǎng)、顯色來(lái)測(cè)定的方法，即糞大腸菌在紙片培養(yǎng)基上呈紅色菌落，菌落周?chē)a(chǎn)生黃圈是糞大腸菌分解乳糖產(chǎn)酸使指示劑變色的結(jié)果。

１．３．２　檢測(cè)方法

（１）將適量待測(cè)液加到紙片上后于４５℃培養(yǎng)１８～２４ｈ。

（２）觀察結(jié)果，根據(jù)陽(yáng)性紙片張數(shù)，查ＭＰＮ 值表，報(bào)出結(jié)果。

１．４　酶底物法（ＥＳＴ）

１．４．１　原理

酶底物法是利用大腸菌群細(xì)菌能產(chǎn)生β－半乳糖苷酶（β－Ｄ－Ｇａｌａｅｔｏｓｉｄａｓｅ）分解ＰＧ（Ｏｒｔｈｏｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙ１－β－Ｄ－Ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）使培養(yǎng)液呈黃色，以及大腸埃希氏菌產(chǎn)生葡萄糖醛酸酶（１３－Ｇｌｕｅｕｒｏｎｉｄａｓｅ）分解ＭＵＧ（４－ｍｅｔｈＹ１－ｕｍｂｅｌｌｌｆｅｒｙ－β－ＤＧｌｕｃｕｒｏｎｉｄｅ）使培養(yǎng)液在波長(zhǎng)３６６ｎｍ紫外光下產(chǎn)生熒光的原理，來(lái)定量分析水樣中糞大腸菌群數(shù)。

１．４．２　檢測(cè)方法

酶底物法采用５１孔或９７孔定量盤(pán)法。檢測(cè)所需水樣為１００ｍＬ。

（１）用１００ｍＬ無(wú)菌稀釋瓶量取１００ｍＬ水樣，加入（２．７±０．５）ｇ　ＭＭＯ－ＭＵＧ 培養(yǎng)基粉末，混搖均勻使之完全溶解，將水樣全部倒入５ｌ孔或９７孔無(wú)菌定量盤(pán)內(nèi)，以手撫平定量盤(pán)背面以趕除孔穴內(nèi)氣泡，然后用封口機(jī)封口。放入４４℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)２４ｈ。

（２）培養(yǎng)后進(jìn)行結(jié)果判讀。如果孔穴內(nèi)的水樣變成黃色則表示該孔穴中含有大腸菌群。將定量盤(pán)在暗處用波長(zhǎng)為３６６ｎｍ的紫外光燈照射，有黃色反應(yīng)的孔穴如果有藍(lán)色的熒光產(chǎn)生則表示該定量盤(pán)孔穴中含有大腸埃希氏菌。計(jì)算有黃色反應(yīng)及有熒光的孔穴數(shù)，對(duì)照ＭＰＮ 表查出其代表的糞大腸菌群*可能數(shù)。

１．５　聚合酶鏈?zhǔn)郊夹g(shù)（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　ｃｈａｉｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ，

ＰＣＲ）

１．５．１　原理

利用ＰＣＲ技術(shù)擴(kuò)增編碼約２６０ｂｐ的ＬａｃＺ基因（β－半乳糖苷酶基因）和約１５０ｂｐ的Ｕｄｉ　Ａ 基因（β－Ｄ－半乳糖苷酶基因）的ＤＮＡ 片段，可以分別檢

測(cè)大腸菌群數(shù)和大腸桿菌。

１．５．２　檢測(cè)方法

（１）用適當(dāng)方法提取糞大腸菌群混懸液和待測(cè)水樣的ＤＮＡ，提取的ＤＮＡ片段用紫外分光光度法測(cè)定純度和濃度。ＰＣＲ擴(kuò)增反應(yīng)，包括變性、退火和延伸的多次循環(huán)，擴(kuò)增產(chǎn)物用瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)。

（２）將糞大腸菌群混懸液和待測(cè)水樣的ＰＣＲ擴(kuò)

增產(chǎn)物進(jìn)行比較，根據(jù)ＤＮＡ分子量推算，確定水樣中糞大腸菌群數(shù)。

１．６　熒光原位雜交技術(shù)（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　ｉｎ　ｓｉｔｕ　ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）

１．６．１　原理

熒光原位雜交技術(shù)是根據(jù)糞大腸菌群特異的ＤＮＡ序列，以利用熒光標(biāo)記的特異寡聚核苷酸片段作為探針，與待測(cè)水樣中ＤＮＡ分子雜交，經(jīng)熒光檢測(cè)體系在鏡下對(duì)待測(cè)ＤＮＡ進(jìn)行定性、定量分析。

１．６．２　檢測(cè)方法

（１）選擇專(zhuān)門(mén)針對(duì)糞大腸菌群的熒光標(biāo)記探針序列，利用寡核苷酸探針與靶細(xì)胞專(zhuān)一性結(jié)合進(jìn)行生物分析。基本實(shí)驗(yàn)步驟為細(xì)胞固定、雜交、洗脫。

（２）雜交細(xì)胞通常用熒光顯微鏡檢測(cè)，利用流式細(xì)胞儀對(duì)每一個(gè)靶細(xì)胞的探針雜交物的熒光強(qiáng)度進(jìn)行定量測(cè)定，然后確定菌群數(shù)。

２　各種檢測(cè)方法的比較

多管發(fā)酵法和濾膜法是糞大腸菌群標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，這２種方法檢測(cè)時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)（４８～７２ｈ），需確認(rèn)試驗(yàn)，試驗(yàn)步驟較為繁瑣，干擾因素多，不適于大量樣品的分析，也不能對(duì)水的衛(wèi)生學(xué)狀況做出快速評(píng)價(jià)。但標(biāo)準(zhǔn)方法具有費(fèi)用較低、原理簡(jiǎn)單、利于推廣的優(yōu)點(diǎn)，此仍是常規(guī)監(jiān)測(cè)中的主要檢測(cè)方法。紙片法和酶底物法，只需１８～２４ｈ培養(yǎng)即可報(bào)告結(jié)果，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果可靠，不需要確認(rèn)試驗(yàn)，酶底物法還可同時(shí)檢測(cè)水中大腸菌群和大腸埃希氏菌的污染狀況。紙片法是中國(guó)環(huán)境監(jiān)測(cè)總站推薦的試用方法，酶底物法已經(jīng)被世界各國(guó)國(guó)家及地方實(shí)驗(yàn)室和世界各組織機(jī)構(gòu)認(rèn)可，能夠較**地判斷水樣的微生物污染狀況，適宜污染事故應(yīng)急監(jiān)測(cè)。ＰＣＲ技術(shù)用于大腸菌群的檢測(cè)仍然處于研究階段，還有許多技術(shù)上的限制需要突破，技術(shù)復(fù)雜，檢測(cè)費(fèi)用較高，假陰性和假陽(yáng)性的比例較高，缺乏精度，還有待于進(jìn)一步改進(jìn)，目前還不能廣泛用于糞大腸菌群的日常檢測(cè)。ＦＩＳＨ 技術(shù)是細(xì)胞水平上的一

種高度專(zhuān)一性檢測(cè)方法。它可以在８ｈ內(nèi)給出定量檢測(cè)結(jié)果，有極低的假陽(yáng)性和假陰性的比例。但其操作步驟較煩瑣，技術(shù)復(fù)雜，目前僅可以對(duì)水樣中低濃度菌群進(jìn)行計(jì)數(shù)，不利于大規(guī)模推廣，因此ＦＩＳＨ技術(shù)沒(méi)有廣泛用于糞大腸菌群的常規(guī)監(jiān)測(cè)。

３　各種檢測(cè)方法的應(yīng)用

多管發(fā)酵法和濾膜法是糞大腸菌群標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，是常規(guī)監(jiān)測(cè)中的主要檢測(cè)方法，本文主要介紹其它幾種方法的應(yīng)用。

３．１　紙片法

紙片法是中國(guó)環(huán)境監(jiān)測(cè)總站推薦的試用方法，適宜污染事故應(yīng)急監(jiān)測(cè)，在食品行業(yè)和食具**效果中廣泛應(yīng)用。頓玉慧［２］使用３ＭＰｅｔｒｉｆｉｌｍ腸桿菌科檢測(cè)紙片計(jì)數(shù)溫州七里港口水域中的腸桿菌科，并同ＳＮ 方法進(jìn)行檢測(cè)比對(duì)，結(jié)果證明使用３ＭＰｅｔｒｉｆｉｌｍ 檢測(cè)片來(lái)檢測(cè)水域中的腸桿菌科是可行的，２種方法檢測(cè)的結(jié)果差異不顯著。趙凌宇［３］采集蘇州具有代表性的地表水水體２２個(gè)點(diǎn)位的樣品，進(jìn)行糞大腸菌群的測(cè)定方法比較，認(rèn)為紙片法適于測(cè)定受糞便污染程度較輕的湖泊水體。但是，該方法的培養(yǎng)時(shí)間對(duì)

陽(yáng)性管率有明顯影響，認(rèn)為１６～１８ｈ是比較理想的培養(yǎng)時(shí)間。趙春霞［４］用多管發(fā)酵法與快速紙片法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)菌株和環(huán)境水樣的對(duì)比，認(rèn)為紙片法操作和結(jié)果判斷均較容易，精密度判斷值Ｒ＝０．２１９　５，在受控范圍內(nèi)，與多管發(fā)酵法的相關(guān)性也很好（ｒ＝

０．９３）。林彩華［５］將３Ｍ Ｐｅｔｒｉｆｉｌｍ 法應(yīng)用于出口水產(chǎn)品的檢測(cè)，認(rèn)為３ＭＰｅｔｒｉｆｉｌｍ法檢測(cè)大腸菌群的靈敏度不夠，無(wú)法檢測(cè)每克樣品含菌量１０個(gè)以下。孔梅［６］利用紙片法對(duì)食具**效果進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)出現(xiàn)可疑結(jié)果的紙片放入乳糖膽鹽培養(yǎng)液中再按常規(guī)發(fā)酵法的程序進(jìn)行大腸菌群檢測(cè)，可提高紙片法的靈敏度，增加與常規(guī)發(fā)酵法的陽(yáng)性符合率。２００８年綠洲生化致病菌測(cè)試片系列產(chǎn)品在北京奧運(yùn)會(huì)食品**保障和抗震救災(zāi)中，成為衛(wèi)生部指定采購(gòu)產(chǎn)品；２００９年病原微生物測(cè)試片項(xiàng)目被列入科技部科技型中小企業(yè)技術(shù)**基金項(xiàng)目；２０１０年上海世博會(huì)和廣州亞運(yùn)會(huì)中，微生物快速檢驗(yàn)產(chǎn)品進(jìn)一步得到成功應(yīng)用。

３．２　酶底物法

酶底物法已經(jīng)被世界各國(guó)國(guó)家及地方實(shí)驗(yàn)室和世界各組織機(jī)構(gòu)認(rèn)可，能夠較**地判斷水樣的微生物污染狀況，廣泛用于糞大腸菌群的日常檢測(cè)。孫宗科［７］應(yīng)用加標(biāo)試驗(yàn)和實(shí)際水樣檢測(cè)的方式比較酶底物法與多管發(fā)酵法用于水中大腸菌群的檢測(cè)方法的優(yōu)劣和結(jié)果的一致性，得出檢測(cè)結(jié)果具有一致性（Ｐ＝０１０　５９），假陽(yáng)性率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差別（Ｐ

＝１．０００），可以用作評(píng)價(jià)水質(zhì)微生物污染的標(biāo)準(zhǔn)方法。趙春霞［４］用標(biāo)準(zhǔn)菌株和環(huán)境水樣進(jìn)行對(duì)比，酶底物法精密度判斷值Ｒ＝０．１３２　４，在受控范圍內(nèi)，與多管發(fā)酵法也具有良好的相關(guān)性（ｒ＝０．８９）。鄭晶［８］用酶底物法檢測(cè)蔬菜中大腸菌群，與ＳＮ方法測(cè)試結(jié)果較為接近，無(wú)明顯的差異。孫錫娟［９］用酶底物快速檢測(cè)法檢測(cè)糞源性污染的蔬菜樣品，結(jié)果表明該法敏感性及準(zhǔn)確性與多管發(fā)酵法相一致。２００８年科立得協(xié)助北京自來(lái)水公司、北京環(huán)境監(jiān)測(cè)站、中國(guó)**預(yù)防控制中心、北京**預(yù)防控制中心、天津**預(yù)防控制中心等完成奧運(yùn)**供水工作；美國(guó)愛(ài)德士（ＩＤＥＸＸ）公司科立得試劑在地震災(zāi)區(qū)等條件惡劣地區(qū)仍能**準(zhǔn)確檢測(cè)居民用水。

３．３　其它方法

Ｂｅｊ等［１０］將多重ＰＣＲ用于檢測(cè)與總大腸菌群相關(guān)的基因序列，這些序列與腸道病原菌包括（Ｅ．ｃｏｌｉ，Ｓａｌｍｏｎｅｉｉａ　ｓｐｐ．和Ｓｈｉｇｅｌｌａ　ａｐｐ．）有關(guān)。Ｊｕｃｋ等［１１］利用嵌套式ＰＣＲ方法，并改進(jìn)了Ｂｅｊ等提出的過(guò)濾方法，快速檢測(cè)水樣中低濃度的Ｅ．ｃｏｌｉ。明鎮(zhèn)寰［１２］對(duì)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（ＰＣＲ）快速檢測(cè)水體指示菌———大腸菌群和大腸桿菌進(jìn)行了研究。采用的２對(duì)引物分別擴(kuò)增了Ｌａｃ　Ｚ基因的約２６０ｂｐ和Ｕｄｉ　Ａ基因的約１５０ｂｐ　ＤＮＡ片段。引物Ⅰ和引物Ⅱ*低能分別擴(kuò)增１０－６μｇ或１０－８μｇ基因組ＤＮＡ。整個(gè)檢測(cè)工作在采集水樣后５～６ｈ內(nèi)完成。與常規(guī)水質(zhì)檢測(cè)法相比，ＰＣＲ法具有快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)，是有效監(jiān)測(cè)環(huán)境水體指示菌的一種潛在的新方法。Ｒｅｇｎａｕｌｔ等［１３］利用Ｃｏｌｉｎｓｉｔｕ探針檢測(cè)了尿、水（河水和生活污水）以及食品中的Ｅ．ｃｏｌｉ和Ｅ．ｆｅｒｇｕｓｏｎｉｉ。該探針對(duì)所研究的不同環(huán)境介質(zhì)中的Ｅ．ｃｏｌｉ具有很好的專(zhuān)一性，已經(jīng)成功地應(yīng)用于飲用水樣品中Ｅ．ｃｏｌｉ的檢測(cè)。ＦＩＳＨ 方法的優(yōu)點(diǎn)是不可培養(yǎng)的大腸菌群也可以被檢測(cè)出，其缺點(diǎn)是死細(xì)胞也可能被計(jì)數(shù)。因此，利用ＦＩＳＨ 方法對(duì)細(xì)菌計(jì)數(shù)后，尚需對(duì)細(xì)菌的生理狀態(tài)進(jìn)行進(jìn)一步研究。黃小平［１４］應(yīng)用顯色熒光方法檢測(cè)牛奶或水中大腸菌群和大腸桿菌，該方法不需驗(yàn)證步驟，研究過(guò)程中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性現(xiàn)象出現(xiàn)，靈敏度可達(dá)到１～５／１００ｍＬ。涂楚國(guó)［１５］ 研究出Ｌａｃｔｏｓｅ－__<___o___Ｔｒｙｐｔｏｎｅ－ＳｏｄｉｕｍＤｏｄｅｃｙｌ　ｓｕｌｆａｔｅ－Ｔｒａｃｅ　Ｅｌｅｍｅｎｔｓ（ＬＴＳＥ）培養(yǎng)基，采用幾種鑒定驗(yàn)證試驗(yàn)的ＬＴＳＥ法，用來(lái)快速檢測(cè)水質(zhì)、食品、冷飲、餐具等各類(lèi)樣品７０３件，結(jié)果與國(guó)標(biāo)法（ＧＢ）對(duì)照總符合率為９９．３％；同時(shí)與美國(guó)《水和廢水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)法》（１６版１９８５年）中檢測(cè)糞大腸菌群的正式Ａ－１法相比較特異性強(qiáng)，靈敏度高，能提高檢出率，并節(jié)約經(jīng)費(fèi)。張江龍［１６］利用法國(guó)ＣＯＬＩＬＥＲＴＲ３０００大腸桿菌在線自動(dòng)監(jiān)測(cè)儀，檢測(cè)到１個(gè)或更多大腸桿菌／１００ｍＬ水的時(shí)間不足１８ｈ，對(duì)于大腸桿菌污染較嚴(yán)重的水體來(lái)說(shuō)，數(shù)小時(shí)之內(nèi)就能檢測(cè)出來(lái)，較傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室方法，大大縮短了測(cè)量時(shí)間，而且可以對(duì)水體中微生物的性質(zhì)進(jìn)行長(zhǎng)期不間斷的采樣分析；由于ＣＯＬＩＬＥＲＴＲ試劑對(duì)大腸桿菌有非常高的選擇性（這點(diǎn)已被世界上許多國(guó)家的研究機(jī)構(gòu)所證實(shí)和認(rèn)可，并通過(guò)了美國(guó)ＵＳＥＰＡ 證實(shí)且被收錄到美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)分析方法），該儀器的分析結(jié)果可信度極高。另外一種相對(duì)較快的大腸桿菌檢測(cè)設(shè)備是**醫(yī)學(xué)科學(xué)院研制的水質(zhì)細(xì)菌檢驗(yàn)箱，其基本原理是使用濾漠－營(yíng)養(yǎng)墊法，所用的培養(yǎng)基是新研制的改良遠(yuǎn)藤培養(yǎng)基，比普通的遠(yuǎn)藤培養(yǎng)基能獲得更加滿(mǎn)意的檢驗(yàn)結(jié)果，尤其是對(duì)水中損傷大腸菌的檢驗(yàn)有較好的效果，６～１５ｈ后可得到糞大腸菌群數(shù)的監(jiān)測(cè)結(jié)果；價(jià)格也不貴。適用于各級(jí)衛(wèi)生防疫部門(mén)，水廠及飲水衛(wèi)生檢驗(yàn)單位、野外工作單位等在實(shí)驗(yàn)室或野外條件下進(jìn)行水中細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群的檢驗(yàn)。

４　結(jié)　語(yǔ)

目前，大腸菌群檢測(cè)方法發(fā)展很快，已提高到分子生物學(xué)水平，使檢測(cè)更快速、準(zhǔn)確。新檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用普及，不僅與操作技術(shù)的簡(jiǎn)易程度和**度有關(guān)，也與檢測(cè)設(shè)備和試劑的費(fèi)用高低、對(duì)環(huán)境的影響等有關(guān)。因此要實(shí)現(xiàn)實(shí)際操作應(yīng)用與普及還需要經(jīng)歷一個(gè)長(zhǎng)期的反復(fù)驗(yàn)證完善過(guò)程，需要不斷改進(jìn)操作細(xì)節(jié)，使新技術(shù)的**度得到認(rèn)可。紙片法和酶底物法以其操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)周期短，將取代多管發(fā)酵法、濾膜法等傳統(tǒng)方法，尤其是酶底物法采用密封培養(yǎng)技術(shù)，在檢測(cè)醫(yī)院污水時(shí)可以減少人員接觸而降低檢測(cè)人員的致病風(fēng)險(xiǎn)，因此具有更強(qiáng)的實(shí)用價(jià)值和應(yīng)用價(jià)值，極有可能在近期成為評(píng)價(jià)水質(zhì)微生物污染的快速標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法之一。自動(dòng)化檢測(cè)方法亦將是監(jiān)測(cè)工作的發(fā)展方向，在新技術(shù)支持下，**、快速、可靠、環(huán)保、低廉的自動(dòng)檢測(cè)儀器也將會(huì)被研發(fā)并得到應(yīng)用與普及。